VALIDACIÓN CLÍNICA DE LA PLATAFORMA UNCOVID PARA LA DETECCIÓN MOLECULAR DE SARS-COV-2

Fecha de registro: Miércoles, 02 Diciembre 2020 11:33
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La pandemia de COVID-19 constituye un reto de salud pública global. En respuesta a ésta se han acelerado esfuerzos para el desarrollo de novedosas pruebas de detección de ácidos nucleicos, tales como aquellas basadas en la tecnología CRISPR/Cas, que permitan la detección rápida, sensible y precisa de SARS-CoV-2 directamente de muestras clínicas, con equipamiento mínimo y mayor potencial escalable que la prueba de referencia qRT-PCR. Con ello se busca incrementar la capacidad de testeo molecular, que es el enfoque más confiable para la detección temprana de infección por SARS-CoV-2. Nuestro grupo de investigación implementó la plataforma diagnóstica UnCovid, un sistema de detección fluorescente basado en CRISPR/Cas12a. Se seleccionaron in silico las secuencias diana de detección en el gen estructural N y dos regiones conservadas (CI-CII) del genoma viral de SARS-CoV-2, así como los ARNs guía. La prueba de concepto con muestras simuladas de origen sintético mostró alta sensibilidad y especificidad analítica. UnCovid permite detectar de manera directa las secuencias diana de SARS-CoV-2 y del gen codificante de la RNAsa P humana (control de extracción de muestra) amplificadas en un paso previo de RT-PCR convencional. El resultado puede ser visualizado a simple vista utilizando un transiluminador de luz azul convencional y la señal obtenida es cuantificable en un lector de fluorescencia. En la estandarización de UnCovid se implementó el proceso de producción de la enzima LbCas12a y ARNs guía, lo que permite contar con una provisión local de los componentes biológicos del sistema de detección. Hemos iniciado la etapa de validación clínica para evaluar el desempeño diagnóstico de UnCovid en muestras de hisopado nasofaríngeo provenientes de casos de COVID-19 y sujetos no enfermos con resultado diagnóstico comprobado por qRT-PCR. De comprobarse la validez diagnóstica de UnCovid, éste podría producirse en formato de kit diagnóstico, posibilitando su uso en laboratorios a nivel nacional que cuenten con equipamiento mínimo para ensayos de diagnóstico molecular. En colaboración con el laboratorio portátil de nuestros colaboradores (BentoLab), UnCovid podría habilitar centros de atención primaria de salud para la detección in situ del virus.
Id_row:
F1CBD212-C8C1-46F6-A9E3-3E9DA956041E
Nu_investigacion:
1583
Autores:
KATHERIN LIZET PEÑARANDA MANRIQUE, POHL LUIS MILON MAYER, ROBERTO HUGO ALCANTARA ESTELA, VANESSA KARINA ADAUI SICHERI
Palabras_clave:
COVID-19, CRISPR-CAS SYSTEMS, MOLECULAR DIAGNOSTIC TECHNIQUES, SARS-COV-2
Url:
https://www.ins.gob.pe/prisa/ver_investigacion.aspx?F1CBD212-C8C1-46F6-A9E3-3E9DA956041E

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